样品保存及运输的注意事项
（适用于蛋白、 total RNA 及DNA）
一：样品的保存方法与运输条件
样品分类 | 处理方法 | 储存方式 | 保存介质 | 运输条件 | ||
A 组织 | 动物 | 完整个体（蜜蜂、果蝇、家蚕等） | 直接浸没在液氮中 | 冻存管>试管# | 无介质 | 液氮/干冰 （低于-70℃） |
内脏器官（心、肝、脾、肺、肾等） | 从活体上取下的组织应在15分钟内浸没迅速降温，干冰或低温冰箱降温速度慢，可能会引起降解 | 冻存管>试管 | 液氮/干冰 （低于-70℃）/ 如加有RNAlater 可用胶冰或常温（短途） | |||
神经、分泌系统（血管、腺体、下丘脑、垂体等） | ||||||
结缔组织（需研磨）（皮肤、粘膜、软骨等） | ||||||
植物 | 常规植物（水稻、拟南芥等） | 液氮/干冰 （低于-70℃） | ||||
多糖多酚的植物（甘蔗、杨树、茶叶等） | ||||||
血样 | 人血 | 加抗凝剂 | 采血管>冻存管 | 抗凝剂 | 干冰（长途）/冰 | |
其他 | 需要研磨的组织（藻类等） | 冻存管>试管 | 无介质 | 液氮/干冰 （低于-70℃） | ||
体积较小的组织（胚胎、受精卵等） | TRlzol/无介质 | |||||
量极少的组织（LCM切片等） | RLT buffer | |||||
B细胞 | 已处理 | 已加TRlzol或其他试剂 | 每5*106加1ml TRlzol | 冻存管>试管 | TRlzol##/其他裂解液 | 液氮/干冰 （低于-70℃） |
未处理 | 培养瓶中的细胞 | 封口膜密封 | 加满培养液 | 常温（仅短途） | ||
需要研磨的（酵母、念珠菌等） | 不处理 | 无介质 | 液氮/干冰 （低于-70℃） | |||
C RNA | 已溶解 | 必须用RNase-free的试管保存 | 1.5ml离心管 进口>国产 | RNase-free H2O / DEPC H2O | 液氮/干冰 （低于-70℃） | |
未溶解 | 75%或无水乙醇 | 液氮/干冰/冰 | ||||
D DNA | 已溶解 | 1.5ml离心管 进口>国产 | Dd H2O/TE | 冰/常温 | ||
未溶解 | 75%或无水乙醇 | 冰/常温 | ||||
说明：
#：“>”表示优先级，如“冻存管>试管”表示用冻存管比用试管保存更好；
##：所有的要加TRlzo的样品仅针对提取totalRNA 而言，如要提取 miRNA，则应加Ambio miRNA抽提 Kit中的 lysis buffer。
二、注意事项
1、接样
1．从活体上取下的组织应在15分钟内用液氮浸没迅速降温，干冰或低温冰箱降温速度慢，可能会引起降解。
2．组织从液氮中转移入试管时，应避免将液氮带入试管，否则会引起试管爆裂。
3．体积较小的组织可以直接用RNAlater保存；体积较大的组织，如用RNA later保存必须切成小块，张、宽、高至少有一维长度小于5mm，按1体积组织加入10倍体积的RNA later,将组织块完全浸没。在4℃冰箱放置过夜，使RNA later充分浸润组织。第二天转移至-20℃冰箱保存。细胞不建议用RNAlater保存（不利于细胞收集）。
4．由于TRIzol无法完全渗透到体积较大的组织中，因此未经研磨或匀浆的组织不宜用TRIzol保存。
5．如用液氮运输，除冻存管外其他各类试管也必须是螺口的，最好用封口膜密封；不建议国产试管（密封性较差），装大量组织的大容积国产试管（如50ml 离心管）要打孔。
6．培养瓶中的细胞收集；小心倾倒出培养液后，（如培养液粘稠，可用1×PBS洗去培养液）按比例加入TRIzol，用力振下贴在壁上的细胞，可用枪反复吸打帮助细胞脱壁。
每5×106加入1ml TRIzol，加入过量的TRIzol反而会建设RNA提取的得率。
7．酒精保存的样品在干冰及冰中为液态，建议用封口膜（尤其是国产试管）以防样品泄露。
8．已溶解的RNA和DNA尽量用离心管保存，可以避免转管造成损耗。
9．常规贴纸和医用胶带在干冰和液氮等低温环境中会失去粘性而脱落，因此试管上应用不溶于水的记号笔标明样品编号。
10．单份样品的送样量不要过多，就常规物种而言，抽提所需量为：植物组织〈1g，动物组织〈100mg，细胞〈107。如果担心抽提率低，可以分装在若干管中作为备份样品。
11．务必在接样服务单上写清一下信息：所有样品类型、样品编号、保存的介质、细胞数、已溶解的RNA和DNA的准确体积、特殊要求（合并抽提、等量混合、剩余组织保留、特殊物种的抽提方法）…
2 运输
如用冰运输血样，在运输过程中应注意避免试管倾倒和摇晃。
细胞及RNA如用冰运输，要保证运输过程中样品布溶解----冬季应保证冰量充足，夏季不建议用冰运输，长途水溶的RNA应当用干冰。
DNA不易降解，常温即可运输。
用干冰/冰运输的样品，应深埋在干冰/冰下（充分接触）。由于今年起干冰不能空运，外地送样应放足干冰，以保证样品的安全。
液氮运输则切忌旋紧盖子，还要尽量避免震动和摇晃，以免氮气膨胀而爆炸。长途运输不建议用液氮。
